大鼠elisa試劑盒使用期間注意事項
瀏覽次數(shù):1137發(fā)布日期:2021-07-20
大鼠elisa試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。將抗大鼠IL-4單克隆抗體包被在酶標(biāo)板上;分別加入梯度稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品和預(yù)稀釋的樣本,標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的大鼠IL-4會與酶標(biāo)板上的包被抗體充分結(jié)合;洗板后加入生物素化抗大鼠IL-4抗體,該抗體會與板子上包被抗體捕獲的標(biāo)準(zhǔn)品和樣本中的大鼠IL-4發(fā)生特異性結(jié)合;洗板后加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的鏈霉親和素,生物素與鏈霉親和素會發(fā)生高強(qiáng)度的非共價結(jié)合;洗板后加入顯色劑底物TMB,若反應(yīng)孔中樣品存在不同濃度的大鼠IL-4,則HRP會使無色TMB變成不同深淺(正相關(guān))的藍(lán)色物質(zhì),加入終止液后反應(yīng)孔會變成黃色;在2max=450nm(OD=450nm)處測定反應(yīng)孔樣品吸光度(OD),樣本中的大鼠IL-4濃度與OD成正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線和四參數(shù)擬合軟件便可計算出樣本中大鼠IL-4的濃度。
大鼠elisa試劑盒注意事項:
1.試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2.試劑盒未使用時應(yīng)保存在2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請丟棄。
3.試劑盒使用前請在室溫恢復(fù)30min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4.在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5.為避免交叉污染,請在試驗中使用1次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6.濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運(yùn)輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10S即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7.除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8.為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。